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基因测序是什么原理?
病情描述:
测取基因的顺序用的是基因测序,它的原理是什么?
医生回答专区 因不能面诊,医生的建议仅供参考
  • 夏廷毅 主任医师 北京华信医院 2018-12-15 14:26
    DNA测序的方法有很多种,目前最常见的是双脱氧终止法了。在测序用的缓冲液中含有四种dNTP及聚合酶,测序时分成四个反应,每个反应除上述成分外分别加入2,3-双脱氧的A、C、G,T核苷三磷酸(称为ddATP,ddCTP,ddGTP,ddTTP),然后进行聚合反应。在第一个反应物中,ddATP会随机地代替dATP参加反应一旦ddATP加入了新合成的DNA链,由于其3位的羟基变成了氢,所以不能继续延伸。所以第一个反应中所产生的DNA链都是到A就终止了。同理第二个反应产生的都是以C结尾的,第三个反应的都以G结尾,第四个反应的都以T结尾, 电泳后就可以读出序列了。
  • 张鞾 副主任医师 江苏省中西医结合医院 2018-12-15 14:26
    这个测序法,加了四种材料进去,ddT、ddA、ddG、ddC,能和原始的DNA序列配对,但因特殊的结构,导致复制终止。测定过程中,将待测样品分为4份,每份中加入一样改变后的材料。结束后,第一份中所有片段全是以ddT为终端的不同长度的序列,以此类推形成了长度不同,可以分辨出长短不同的序列,然后在看看这个序列对应的添加的材料是哪一种,就能按照序列的长短来确定相应的脱氧核苷酸了。
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